3DGenomes/TADbit入门教程:Hi-C数据分析与TAD识别指南
什么是3DGenomes/TADbit
3DGenomes/TADbit是一个用于分析染色体三维结构和识别拓扑关联域(TAD)的Python工具包。它专门设计用于处理Hi-C数据,能够从原始交互矩阵中识别染色体上的功能区域边界,帮助研究人员理解基因组的三维组织结构。
Hi-C数据格式基础
Hi-C数据通常以对称矩阵的形式存储,矩阵中的每个值代表两个基因组区域之间的交互频率。典型的Hi-C数据格式如下:
chrT_001 chrT_002 chrT_003 chrT_004 chrT_005 chrT_006
chrT_001 629 164 88 105 10 35
chrT_002 86 612 175 110 40 29
chrT_003 159 216 437 105 43 73
数据加载方法
在TADbit中,我们可以通过以下方式加载Hi-C数据:
from pytadbit import Chromosome
# 创建染色体对象
my_chrom = Chromosome(name='chr19', centromere_search=True,
species='Homo sapiens', assembly='NCBI36')
# 加载Hi-C实验数据
my_chrom.add_experiment('k562', cell_type='wild type', exp_type='Hi-C',
hic_data="sample_data/HIC_k562_chr19_100000_obs.txt",
resolution=100000)
注意事项:
- TADbit默认假设Hi-C矩阵从染色体位置1开始
- 如果矩阵不包含完整的染色体长度,缺失的行列应填充为零
- 支持直接读取gzip压缩文件
实验对象操作
实验对象基础
加载的实验数据存储在特殊的实验列表中,可以通过名称或索引访问:
# 访问实验对象
exp1 = my_chrom.experiments[0]
exp2 = my_chrom.experiments["k562"]
实验数据合并
两个Hi-C实验可以相加合并,但建议先进行归一化处理:
# 合并两个实验
combined_exp = my_chrom.experiments["k562"] + my_chrom.experiments["gm06690"]
my_chrom.add_experiment(combined_exp)
注意:合并前应先进行归一化,以避免偏向交互计数更多的实验。
Hi-C数据可视化
TADbit提供了直观的可视化功能,可以快速查看交互矩阵:
# 单个实验可视化
exp1.view()
# 多实验对比可视化
my_chrom.visualize([('k562', 'gm06690'), 'k562+gm06690'])
可视化支持对数转换后的交互计数显示,便于观察不同区域间的相互作用强度。
TAD识别与分析
基本TAD识别
使用TADbit的核心功能识别拓扑关联域:
# 识别TAD
my_chrom.find_tad('k562', n_cpus=8)
my_chrom.find_tad('gm06690', n_cpus=8)
识别结果存储在实验对象的tads属性中,包含每个TAD的起始、结束位置和置信度评分。
TAD结果输出
TAD边界信息可以输出到文件或直接查看:
# 输出TAD边界
exp1.write_tad_borders()
TAD可视化
TAD边界可以在交互矩阵上直观显示:
# 在矩阵上显示TAD边界
my_chrom.visualize(exp1.name, paint_tads=True)
线宽与TAD边界的置信度评分成正比,便于评估边界可靠性。
密度图分析
TADbit还提供密度图来总结TAD特征:
# 生成TAD密度图
my_chrom.tad_density_plot('k562')
图中灰色弧代表TAD,高度反映相对交互量;彩色三角形标记边界,颜色从蓝到红表示置信度。
高级功能
多实验联合分析
TADbit支持基于多个Hi-C实验联合识别TAD:
# 批量模式识别TAD
my_chrom.find_tad(['k562', 'gm06690'], batch_mode=True, n_cpus=8)
限制区域处理
可以设置TAD的最大尺寸限制和中心粒区域处理:
# 设置TAD最大尺寸
my_chrom.set_max_tad_size(3000000)
# 自动识别中心粒区域(创建染色体对象时设置)
my_chrom = Chromosome(..., centromere_search=True)
数据保存与加载
分析结果可以保存以便后续使用:
# 保存染色体对象
my_chrom.save_chromosome("analysis_results.tdb")
# 加载保存的分析
from pytadbit import load_chromosome
loaded_chrom = load_chromosome("analysis_results.tdb")
注意:为节省空间,保存时不包括原始Hi-C数据,需要时重新加载。
总结
3DGenomes/TADbit提供了一套完整的工具链,从Hi-C数据加载、预处理到TAD识别和可视化分析。通过本教程,用户可以掌握基本操作流程,为进一步的3D基因组学研究奠定基础。特别值得注意的是其多实验联合分析能力和灵活的可视化功能,为比较不同条件下的染色体结构变化提供了强大支持。
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