Seurat项目中整合健康与疾病样本数据的处理方法
2025-07-02 13:06:13作者:毕习沙Eudora
概述
在单细胞RNA测序数据分析中,使用Seurat包进行样本整合是常见的预处理步骤。当研究人员同时分析健康对照(HC)和疾病样本时,经常需要将这些样本按照实验条件(健康vs疾病)而非单个样本进行分组分析。本文将详细介绍如何在Seurat中实现这一目标。
问题背景
在标准分析流程中,样本通常会按照其原始名称(如HC1、HC2、HC3等)被分开处理。然而,研究人员往往更关注健康组与疾病组之间的整体差异,而非单个样本间的差异。这就需要我们对样本进行重新分组。
解决方案
1. 创建新的分组变量
在Seurat对象中,我们可以通过添加新的元数据列来实现样本的重新分组:
# 假设原始样本名称为HC1、HC2、HC3(健康组)和D1、D2、D3(疾病组)
object$group <- ifelse(grepl("HC", object$Sample_Name), "HC", "Disease")
或者更通用的方法:
object$group <- paste0(object$Sample_Name, "_", object$condition)
2. 基于新分组进行整合分析
创建新分组变量后,可以按照以下步骤进行整合分析:
# 按照新定义的分组拆分对象
split.obj <- SplitObject(filtered.PSAHC, split.by = "group")
# 标准化和识别可变特征
split.obj <- lapply(split.obj, function(x) {
x <- NormalizeData(x)
x <- FindVariableFeatures(x, selection.method = "vst", nfeatures = 2000)
})
# 选择跨数据集的可变特征
integ.features <- SelectIntegrationFeatures(object.list = split.obj, nfeatures = 2000)
# 寻找整合锚点
anchors <- FindIntegrationAnchors(object.list = split.obj, anchor.features = integ.features)
# 整合数据
integrated.obj <- IntegrateData(anchorset = anchors)
3. 下游分析
整合完成后,可以继续进行降维和聚类分析:
# 设置默认分析为整合后的数据
DefaultAssay(integrated.obj) <- "integrated"
# 缩放数据
integrated.obj <- ScaleData(integrated.obj)
# 运行PCA
integrated.obj <- RunPCA(integrated.obj, npcs = 30)
# 运行UMAP
integrated.obj <- RunUMAP(integrated.obj, reduction = "pca", dims = 1:20)
# 可视化
DimPlot(integrated.obj, group.by = "group")
注意事项
-
样本平衡:当健康组和疾病组的样本数量不均衡时,可能会影响整合效果。可以考虑使用
FindIntegrationAnchors
中的sample.tree
参数进行手动调整。 -
批次效应:即使按照实验条件分组,仍需注意批次效应的影响。可以在整合时考虑加入批次校正。
-
质量控制:在整合前,应确保各组样本都经过了严格的质量控制,去除低质量细胞。
-
特征选择:
nfeatures
参数的选择会影响整合效果,通常建议在2000-3000之间,可根据数据特点调整。
高级技巧
对于更复杂的实验设计,可以考虑:
- 层次整合:先整合组内样本,再整合组间数据
- 参考整合:指定一个组作为参考,其他组与之整合
- 加权整合:根据样本质量或细胞数量调整整合权重
通过以上方法,研究人员可以更灵活地控制数据整合过程,获得更有生物学意义的分析结果。
登录后查看全文
热门项目推荐
- QQwen3-Next-80B-A3B-InstructQwen3-Next-80B-A3B-Instruct 是一款支持超长上下文(最高 256K tokens)、具备高效推理与卓越性能的指令微调大模型00
- QQwen3-Next-80B-A3B-ThinkingQwen3-Next-80B-A3B-Thinking 在复杂推理和强化学习任务中超越 30B–32B 同类模型,并在多项基准测试中优于 Gemini-2.5-Flash-Thinking00
GitCode-文心大模型-智源研究院AI应用开发大赛
GitCode&文心大模型&智源研究院强强联合,发起的AI应用开发大赛;总奖池8W,单人最高可得价值3W奖励。快来参加吧~0265cinatra
c++20实现的跨平台、header only、跨平台的高性能http库。C++00AI内容魔方
AI内容专区,汇集全球AI开源项目,集结模块、可组合的内容,致力于分享、交流。02- HHunyuan-MT-7B腾讯混元翻译模型主要支持33种语言间的互译,包括中国五种少数民族语言。00
GOT-OCR-2.0-hf
阶跃星辰StepFun推出的GOT-OCR-2.0-hf是一款强大的多语言OCR开源模型,支持从普通文档到复杂场景的文字识别。它能精准处理表格、图表、数学公式、几何图形甚至乐谱等特殊内容,输出结果可通过第三方工具渲染成多种格式。模型支持1024×1024高分辨率输入,具备多页批量处理、动态分块识别和交互式区域选择等创新功能,用户可通过坐标或颜色指定识别区域。基于Apache 2.0协议开源,提供Hugging Face演示和完整代码,适用于学术研究到工业应用的广泛场景,为OCR领域带来突破性解决方案。00- HHowToCook程序员在家做饭方法指南。Programmer's guide about how to cook at home (Chinese only).Dockerfile06
- PpathwayPathway is an open framework for high-throughput and low-latency real-time data processing.Python00
热门内容推荐
1 freeCodeCamp音乐播放器项目中的函数调用问题解析2 freeCodeCamp论坛排行榜项目中的错误日志规范要求3 freeCodeCamp猫照片应用教程中的HTML注释测试问题分析4 freeCodeCamp JavaScript高阶函数中的对象引用陷阱解析5 freeCodeCamp全栈开发课程中React实验项目的分类修正6 freeCodeCamp课程视频测验中的Tab键导航问题解析7 freeCodeCamp全栈开发课程中React组件导出方式的衔接问题分析8 freeCodeCamp英语课程视频测验选项与提示不匹配问题分析9 freeCodeCamp课程页面空白问题的技术分析与解决方案10 freeCodeCamp博客页面工作坊中的断言方法优化建议
最新内容推荐
项目优选
收起

OpenHarmony documentation | OpenHarmony开发者文档
Dockerfile
139
1.91 K

deepin linux kernel
C
22
6

Nop Platform 2.0是基于可逆计算理论实现的采用面向语言编程范式的新一代低代码开发平台,包含基于全新原理从零开始研发的GraphQL引擎、ORM引擎、工作流引擎、报表引擎、规则引擎、批处理引引擎等完整设计。nop-entropy是它的后端部分,采用java语言实现,可选择集成Spring框架或者Quarkus框架。中小企业可以免费商用
Java
8
0

React Native鸿蒙化仓库
C++
192
273

🎉 (RuoYi)官方仓库 基于SpringBoot,Spring Security,JWT,Vue3 & Vite、Element Plus 的前后端分离权限管理系统
Vue
923
551

旨在打造算法先进、性能卓越、高效敏捷、安全可靠的密码套件,通过轻量级、可剪裁的软件技术架构满足各行业不同场景的多样化要求,让密码技术应用更简单,同时探索后量子等先进算法创新实践,构建密码前沿技术底座!
C
421
392

openGauss kernel ~ openGauss is an open source relational database management system
C++
145
189

为非计算机科班出身 (例如财经类高校金融学院) 同学量身定制,新手友好,让学生以亲身实践开源开发的方式,学会使用计算机自动化自己的科研/创新工作。案例以量化投资为主线,涉及 Bash、Python、SQL、BI、AI 等全技术栈,培养面向未来的数智化人才 (如数据工程师、数据分析师、数据科学家、数据决策者、量化投资人)。
Jupyter Notebook
74
64

本仓将收集和展示高质量的仓颉示例代码,欢迎大家投稿,让全世界看到您的妙趣设计,也让更多人通过您的编码理解和喜爱仓颉语言。
Cangjie
344
1.3 K

Elasticsearch
国内Top1 elasticsearch搜索引擎框架es ORM框架,索引全自动智能托管,如丝般顺滑,与Mybatis-plus一致的API,屏蔽语言差异,开发者只需要会MySQL语法即可完成对Es的相关操作,零额外学习成本.底层采用RestHighLevelClient,兼具低码,易用,易拓展等特性,支持es独有的高亮,权重,分词,Geo,嵌套,父子类型等功能...
Java
36
8